如何使用TASSEL做GWAS说明文档
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分享一篇我做的说明文档,用示例数据,一步一步进行GWAS分析。具体如下:
1. 下载安装软件
下载地址:http://tassel.bitbucket.org/
这里下载的是win的64为系统,截图如下:
安装成功后,打开菜单如下:
2. 导入数据
数据下载地址:http://tassel.bitbucket.org/
截图如下:
打开data,load,选择Make Best Guess
选择几个示例数据:
打开后的数据如下
里面包括系谱数据、性状数据和基因型数据(snp)。
3. 处理数据
3.1清洗数据
选中mdp_trait,
然后选择:Data中的TransformPhenotype,
可以对数据进行转化、标准化等操作,注意,要先对数据进行选择,然后再进行操作:
也可以对缺失值的数据进行删除,点击imput,Numerical impute,就会生成没有缺失值的数据,这只是缺失值的不同替换方法。
3.2主成分分析
主成分分析(PCA)是一种统计方法,它可以将相互关联的变量转化为独立的主成分(PC),第一种成分包含最多的组分,其它依次降低。另一个主成分的作用可以用标记的主成分来代表群体结构。这种方法比最大似然法节省时间。因为大部分的分子标记都是字符,需要先将其转化为数值,然后再进行主成分分析,一般将纯合的标记用0代替,另一个纯合子用2代替,杂合的用1代替。PCA要求变量不能有缺失值,因此,在进行主成分分析时,需要对数据进行清洗,去除缺失值。
去掉频率小于0.05的标记,可以选择Data,选择Site,然后在最小频率的框中键入0.05,然后选择Remove minor SNP status,然后点击Filter,进行过滤,模型如下:
选择PCA,然后选择5个主成分(默认项),点击确定,就会生成结果,模型如下:
结果如下:
3.3用基因标记估计系谱
利用主成分分析可以判断群体的结构特征,但是如果利用系谱信息,这种结果会更加准确。可以用基因型数据生成系谱信息,首先选中基因型数据,点击Analysis,选择Kinship
结果如下:
3.4用一般线性模型分析GLM
下面我们用GLM模型来分析示例数据,mdp_genotype.hmp.txt是snp数据,里面有3093个标记,281个玉米自交系,另一个文件是mdp_population_structure.txt,里面是282个玉米自交系的群体结构,还有一个是mdp_traits.txt,里面是282玉米自交系的表型数据。
首先对基因型数据进行过滤,去掉频率小于0.05的,最小的数目是150,点击过滤,生成过滤后的基因型数据:
然后对数据进行个过滤,选择开花期dpoll这个性状,
进行协变量选择,即选择群体结构的文件,这里我们去掉Q3,数据如下:
合并数据,将这三个过滤好的数据,选中进行合并,点击Data IntersectJoin,
数据合并如下:
然后选中合并后的数据,用analysis ,GLM来进行分析
运行结果如下:
QQ图:
P-value值:
3.5用混合线性模型分析
混合模型需要添加系谱矩阵
点击run
结果:
相关图形:
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